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賽默飛Thermo實時熒光定量PCR儀 CFX96 特點

發(fā)布時間:2025/1/9點擊次數(shù):71

賽默飛Thermo實時熒光定量PCR儀 CFX96 全面介紹

實時熒光定量PCR(Quantitative Polymerase Chain Reaction, qPCR)是一種基于熒光信號檢測的分子生物學技術(shù),用于實時監(jiān)測和定量分析DNA或RNA擴增過程。賽默飛(Thermo Fisher Scientific)作為生命科學技術(shù)公司,其CFX96實時熒光定量PCR儀以高靈敏度、高準確性和靈活性廣受認可,是一款適用于科研、臨床診斷以及工業(yè)應(yīng)用的高性能儀器。本文將從CFX96的特點、技術(shù)參數(shù)、操作流程及應(yīng)用領(lǐng)域等方面,全面介紹這一儀器。


一、儀器概述

賽默飛CFX96實時熒光定量PCR儀是一款以96孔板為基礎(chǔ)的高通量、高靈敏度的qPCR儀器。CFX96專為滿足基因檢測、表達分析、病原體檢測、基因分型及突變研究等多種實驗需求而設(shè)計。其核心特點是擁有強大的光學檢測系統(tǒng)、快速高效的溫控系統(tǒng)以及直觀易用的軟件支持,為用戶提供了靈活的實驗方案和可靠的數(shù)據(jù)支持。

CFX96兼容多種熒光標記體系(如SYBR Green、TaqMan探針等),具有開放式平臺設(shè)計,適應(yīng)性強。儀器通過精準的熒光信號檢測實現(xiàn)對樣品擴增過程的實時監(jiān)控,為科學研究提供精準的實驗數(shù)據(jù)。


二、主要特點

1. 多通道光學系統(tǒng)

CFX96配備了先進的5通道光學檢測系統(tǒng),可同時監(jiān)測多達5種熒光信號。這種多通道設(shè)計支持多靶標檢測,使得單次實驗?zāi)軌驒z測多種基因,為基因表達研究和復雜分子診斷提供了強大的工具。

2. 高靈敏度和寬動態(tài)范圍

CFX96采用高性能光學檢測模塊,能夠檢測低至單拷貝的DNA或RNA,靈敏度。同時,其寬動態(tài)范圍允許從高濃度到低濃度樣品的準確定量分析,確保實驗數(shù)據(jù)的準確性和重復性。

3. 快速高效的溫控系統(tǒng)

CFX96使用Peltier加熱模塊,提供了快速升降溫的能力,使PCR反應(yīng)更高效。其溫控均一性可達±0.2℃,在樣品間提供一致的擴增條件,確保數(shù)據(jù)的可靠性。

4. 靈活的試劑兼容性

CFX96是一款開放式平臺,支持多種試劑體系,如SYBR Green染料、TaqMan探針和分子信標等。用戶可以根據(jù)實驗需求選擇適合的試劑和耗材,降低實驗成本,同時提高實驗設(shè)計的靈活性。

5. 用戶友好的軟件系統(tǒng)

CFX96配備了強大的配套軟件,支持以下功能:

  • 絕對定量:通過標準曲線法確定未知樣品的濃度;

  • 相對定量:分析不同條件下目標基因的表達變化;

  • 基因分型:區(qū)分不同基因型;

  • 熔解曲線分析:用于區(qū)分特異性擴增和非特異性擴增產(chǎn)物;

  • 突變分析:用于基因突變位點檢測。

軟件界面簡潔直觀,實驗設(shè)置和數(shù)據(jù)分析功能豐富,降低了用戶的操作難度。此外,軟件支持實驗報告自動生成和多種數(shù)據(jù)導出格式,便于實驗結(jié)果分享和歸檔。

6. 高通量能力

CFX96支持96孔板格式,適合中高通量實驗需求。其快速PCR模式可顯著縮短實驗時間,為時間緊迫的實驗提供了解決方案。

7. 緊湊設(shè)計與多功能性

CFX96設(shè)計緊湊,占用實驗室空間小,適合各類實驗室環(huán)境。其靈活性和多功能性使其在科研和應(yīng)用實驗中都表現(xiàn)出色。


三、技術(shù)參數(shù)

1. 光學性能

  • 光學系統(tǒng):5通道獨立光學檢測;

  • 熒光染料:支持SYBR Green、FAM、HEX、VIC、ROX、Texas Red、Cy5等多種熒光標記;

  • 動態(tài)范圍:可檢測10個數(shù)量級;

  • 靈敏度:單拷貝靶標檢測。

2. 溫控性能

  • 樣品模塊:96孔板;

  • 溫控范圍:4℃至99.9℃;

  • 溫控均一性:±0.2℃;

  • 升降溫速度:最高可達5℃/秒。

3. 數(shù)據(jù)分析

  • 分析功能:支持標準曲線繪制、Ct值計算、熔解曲線分析、基因分型等;

  • 導出格式:兼容.xlsx、.txt、.pdf等多種格式。

4. 兼容性

  • 試劑:支持多種熒光染料和探針試劑;

  • 耗材:適配標準96孔板及PCR管。

5. 尺寸與重量

  • 儀器尺寸:約33 cm × 50 cm × 50 cm;

  • 重量:約30 kg。


四、操作流程

1. 樣品制備

從實驗材料(如組織、血液、細胞)中提取DNA或RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA(若為RNA樣品)。配置PCR反應(yīng)體系,包括引物、探針或熒光染料、反應(yīng)緩沖液及模板DNA或cDNA。

2. 儀器設(shè)置

  • 打開CFX96儀器,啟動軟件;

  • 根據(jù)實驗設(shè)計選擇檢測模式(SYBR Green、TaqMan探針等);

  • 配置擴增程序,包括退火溫度、循環(huán)次數(shù)等;

  • 分配熒光通道和目標基因信息。

3. 實驗運行

將樣品加載至96孔板中并密封,將樣品板放入儀器中,啟動實驗程序。CFX96將實時監(jiān)測擴增過程并記錄熒光信號。

4. 數(shù)據(jù)分析

實驗完成后,軟件自動生成擴增曲線、Ct值和熔解曲線等實驗結(jié)果。用戶可以進一步分析數(shù)據(jù),并根據(jù)實驗需求導出或保存結(jié)果。


五、應(yīng)用領(lǐng)域

CFX96實時熒光定量PCR儀因其高靈敏度、多功能性和靈活性,被廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:

1. 基因表達研究

利用相對定量方法,研究目標基因在不同條件下的表達水平,為基因功能研究和生物學機制探索提供數(shù)據(jù)支持。

2. 病原體檢測

檢測和定量分析微生物、病毒和其他病原體的核酸,廣泛應(yīng)用于傳染病診斷、食品安全檢測及環(huán)境監(jiān)測。

3. 基因分型

通過熒光信號區(qū)分不同基因型,應(yīng)用于個體化醫(yī)療、遺傳病篩查和藥物基因組學研究。

4. 突變分析

檢測單核苷酸多態(tài)性(SNP)和基因突變,用于癌癥研究、藥物開發(fā)及精準醫(yī)療。

5. 分子診斷

CFX96在遺傳性疾病檢測、腫瘤標志物分析和藥物靶點研究中具有重要作用,為分子診斷領(lǐng)域提供技術(shù)支持。

6. 藥物研發(fā)

支持高通量基因表達篩選和藥物毒理學研究,用于分析藥物對基因表達的影響和潛在靶點的篩選。


六、優(yōu)勢總結(jié)

  1. 高性能光學系統(tǒng):CFX96支持多通道實時檢測,提供精確可靠的數(shù)據(jù)。

  2. 靈活開放的設(shè)計:兼容多種試劑和耗材,適應(yīng)不同實驗需求。

  3. 高通量能力:96孔板設(shè)計適合中高通量實驗,支持快速模式。

  4. 用戶友好軟件:操作簡單,數(shù)據(jù)分析功能強大,適合不同層次用戶。

  5. 廣泛應(yīng)用領(lǐng)域:涵蓋基礎(chǔ)研究、臨床診斷及工業(yè)應(yīng)用。


七、總結(jié)

賽默飛CFX96實時熒光定量PCR儀是一款高性能、多功能、靈活的qPCR儀器,適用于多種分子生物學研究和臨床診斷需求。其先進的光學檢測技術(shù)、高靈敏度、寬動態(tài)范圍和高通量實驗?zāi)芰?,使其成為基因檢測、病原體分析和精準醫(yī)療研究的理想選擇。CFX96不僅能滿足現(xiàn)代科研對高精度數(shù)據(jù)的需求,也能在未來的分子診斷和生物技術(shù)開發(fā)中繼續(xù)發(fā)揮重要作用,為推動科學進步提供強有力的支持。


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