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賽默飛世爾Evolution One 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)工作原理

發(fā)布時(shí)間:2025/2/7點(diǎn)擊次數(shù):73

賽默飛世爾Evolution One 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是一種用于分析樣品吸光度的儀器,廣泛應(yīng)用于化學(xué)分析、生命科學(xué)研究、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。其工作原理基于比爾-朗伯定律(Beer-Lambert Law),通過(guò)測(cè)量樣品對(duì)光的吸收程度來(lái)推算樣品的濃度。以下是該儀器的工作原理詳解:

1. 光源和光譜分散

Evolution One 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)使用氘燈和鎢燈作為光源,其中:

  • 氘燈用于紫外光(UV)范圍,波長(zhǎng)約在190nm至400nm之間。

  • 鎢燈用于可見(jiàn)光(VIS)范圍,波長(zhǎng)大約在400nm至800nm之間。

這些燈發(fā)出的光會(huì)被引導(dǎo)到光路中的單色儀裝置。單色儀的作用是將白光分解為不同波長(zhǎng)的單色光,并選擇某一特定波長(zhǎng)的光進(jìn)入樣品室。

2. 單色儀

單色儀的核心部件通常是光柵棱鏡。這些部件可以將光源發(fā)出的白光分散為不同波長(zhǎng)的光。選擇的特定波長(zhǎng)會(huì)通過(guò)調(diào)節(jié)單色儀的設(shè)置而得到。根據(jù)用戶設(shè)置的波長(zhǎng),光源發(fā)出的光經(jīng)過(guò)單色儀后,光的波長(zhǎng)就可以被準(zhǔn)確選擇。

3. 光通過(guò)樣品

選擇特定波長(zhǎng)的光通過(guò)樣品室照射到待測(cè)樣品上。樣品的吸收性質(zhì)與其所含化學(xué)成分的特性有關(guān)。根據(jù)樣品的化學(xué)成分和濃度,樣品會(huì)吸收某些特定波長(zhǎng)的光,而其他波長(zhǎng)的光則會(huì)透過(guò)樣品。

4. 檢測(cè)器

透過(guò)樣品的光會(huì)被光電探測(cè)器(如光電倍增管(PMT)或光電二極管)接收。探測(cè)器將透過(guò)樣品后的光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),這個(gè)電信號(hào)的強(qiáng)度與樣品吸收的光量成反比。光電探測(cè)器的工作是通過(guò)感知光的強(qiáng)度變化,將其轉(zhuǎn)化為可分析的電信號(hào)。

5. 吸光度計(jì)算

根據(jù)比爾-朗伯定律,吸光度(A)與光的透過(guò)度、樣品濃度和光程長(zhǎng)度之間有著明確的關(guān)系。公式為:

A=εclA = \varepsilon c l

其中:

  • AA 是吸光度,

  • ε\varepsilon 是摩爾吸光系數(shù),

  • cc 是樣品的濃度,

  • ll 是樣品的光程長(zhǎng)度。

在實(shí)際操作中,儀器會(huì)根據(jù)透過(guò)樣品的光強(qiáng)度與原始光強(qiáng)度的比值計(jì)算吸光度,并進(jìn)一步通過(guò)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液來(lái)推算樣品中的未知濃度。

6. 數(shù)據(jù)處理和顯示

經(jīng)過(guò)光電探測(cè)器轉(zhuǎn)換后的電信號(hào)會(huì)送到計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)或儀器本身的處理器中。Evolution One 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)配有先進(jìn)的數(shù)據(jù)處理軟件,可以實(shí)時(shí)顯示吸光度值、生成標(biāo)準(zhǔn)曲線,并進(jìn)行定量分析。同時(shí),儀器可以將結(jié)果保存或輸出成報(bào)告,供研究人員進(jìn)一步分析。

7. 波長(zhǎng)掃描與多通道測(cè)量

一些紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(包括Evolution One)可以進(jìn)行波長(zhǎng)掃描,即在設(shè)定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描樣品的吸光度,繪制吸光度與波長(zhǎng)的關(guān)系圖(光譜圖)。這對(duì)于研究樣品中多種成分的吸光特性和進(jìn)行定性分析非常有用。

此外,Evolution One還支持多通道測(cè)量,意味著它可以同時(shí)在多個(gè)波長(zhǎng)下進(jìn)行測(cè)量,增加了樣品分析的效率,特別適用于復(fù)雜樣品的分析。

總結(jié)

賽默飛世爾Evolution One紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)通過(guò)精確選擇特定波長(zhǎng)的光,測(cè)量樣品對(duì)光的吸收程度,再結(jié)合比爾-朗伯定律推算樣品的濃度等信息。儀器的高精度光學(xué)設(shè)計(jì)和先進(jìn)的數(shù)據(jù)處理功能,使其在科研、質(zhì)量控制和教學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。


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